Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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FKBP6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-406798
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- FKBP6 Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico FKBP6, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: FKBP6 Antibody (AT9B7): sc-517401
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
FKBP6 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-406798 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
FKBP6 codifica per la FK506-binding protein 6, un’immunofilina con attività isomerasi peptidil-prolil cis–trans, che favorisce il ripiegamento proteico e la maturazione dipendente da chaperoni nel citoplasma e nel nucleo. Nella linea germinale, FKBP6 è coinvolta nella progressione meiotica e nella funzione del complesso sinaptonemale, coordinando le interazioni proteina–proteina necessarie per l’appaiamento degli omologhi e la ricombinazione. L’alterazione di FKBP6 è stata associata a difetti della spermatogenesi e a fenotipi di infertilità maschile, rendendola un utile punto di partenza per lo studio della biologia riproduttiva e del controllo di qualità associato alla meiosi. I suoi ruoli molecolari si collegano anche a reti più ampie di proteostasi governate da immunofiline e complessi associati a HSP90, che influenzano stabilità e traffico delle proteine “client”.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO FKBP6 (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene FKBP6 in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del FKBP6 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto FKBP6 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina FKBP6.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di FKBP6 per lo studio della segnalazione di FKBP6, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni FKBP6 critici per la funzione di FKBP6
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di FKBP6 per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal FKBP6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal FKBP6 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus FKBP6. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal FKBP6 Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR FKBP6 (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia FKBP6 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio FKBP6 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.