EYA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404056-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EYA1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase EYA1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase EYA1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EYA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EYA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404056-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
EYA1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404056-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EYA1 codifica o Eyes Absent Homolog 1, um coativador transcricional e fosfatase de dupla especificidade que modula programas gênicos do desenvolvimento por meio de interações com proteínas das famílias SIX e DACH. EYA1 contribui para redes de sinalização associadas à organogênese, integrando o controle da transcrição dependente de fosforilação e decisões de destino celular em vias que regulam a diferenciação epitelial e a manutenção de progenitores. A disfunção de EYA1 está ligada a distúrbios congênitos que afetam o desenvolvimento craniofacial, auditivo e renal, e a expressão alterada tem sido investigada em contextos de progressão tumoral e plasticidade celular. Essas características tornam EYA1 um alvo útil para estudar circuitos transcricionais, biologia do desenvolvimento e expressão gênica regulada por fosfatases.
EYA1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EYA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EYA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EYA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EYA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.