Estrogen Receptor beta Lentiviral Activation Particles (h): sc-400213-LAC

Das humane ESR2-Gen kodiert den Östrogenrezeptor Beta (ERβ), einen ligandaktivierten nukleären Rezeptor, der als Transkriptionsfaktor fungiert und Gen-Netzwerke reguliert, die an Zelldifferenzierung, Proliferation, Apoptose, Entzündung und metabolischer Homöostase beteiligt sind. Nach Bindung von Östrogenen oder selektiven Liganden aktiviert ERβ die klassische nukleäre Rezeptor-Signalgebung über Östrogen-Response-Elemente und interagiert zudem über Crosstalk mit den MAPK/ERK-, PI3K/AKT-, NF-κB- und TGF-β-Signalwegen, um kontextabhängige Transkriptionsprogramme zu formen. Die ESR2-Expression und die ERβ-Aktivität werden mit hormonabhängiger Biologie in Geweben des Reproduktionssystems, des kardiovaskulären Systems, des Immunsystems und des zentralen Nervensystems in Verbindung gebracht und werden häufig im Hinblick auf ihre Rollen in der Tumorbiologie, der endokrinen Regulation und entzündlichen Krankheitsmechanismen untersucht. Eine fehlregulierte ESR2-Signalgebung kann die vom Chromatinzustand abhängige Transkription verändern und macht ESR2 zu einem relevanten Ziel für die Untersuchung von Rezeptor-Isoformen, der Nutzung von Ko-Regulatoren und dem „Rewiring“ von Signalwegen in krankheitsassoziierten Zellmodellen.

Estrogen Receptor beta Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ESR2-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Estrogen Receptor beta Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ESR2-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Estrogen Receptor beta-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ESR2-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.