ERdj3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404935
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ERdj3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ERdj3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ERdj3 Anticorpo (C-7): sc-271240
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ERdj3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404935 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DNAJB11 codifica a ERdj3, uma coaperona Hsp40 luminal do retículo endoplasmático (RE) que atua em parceria com a BiP/HSPA5 para promover o dobramento de proteínas secretórias e de membrana recém-sintetizadas e limitar a agregação. A ERdj3 participa da proteostase do RE ao estimular a atividade ATPase da BiP, coordenar decisões de controle de qualidade ligadas à degradação associada ao RE (ERAD) e modular a sinalização da resposta a proteínas mal dobradas (UPR) durante o estresse do RE. Por meio dessas funções, DNAJB11 influencia a eficiência da via secretória e a adaptação celular à carga de proteínas mal dobradas, processos implicados em distúrbios caracterizados por desequilíbrio da proteostase, incluindo a fisiopatologia renal e hepática, bem como respostas ao estresse associadas ao câncer. Seu papel em redes de chaperonas o torna relevante para estudar como o estresse do RE se integra com apoptose, inflamação e remodelamento metabólico.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ERdj3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DNAJB11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DNAJB11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DNAJB11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ERdj3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DNAJB11 para a investigação da sinalização de ERdj3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DNAJB11 críticos para a função ERdj3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DNAJB11 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ERdj3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ERdj3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DNAJB11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ERdj3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ERdj3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DNAJB11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DNAJB11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.