Plasmide CRISPR/Cas9 KO EphA7 (m): sc-420197
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- EphA7 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique EphA7, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: EphA7 Antibody (E-7): sc-393973
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO EphA7 (m) | sc-420197 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Epha7 code pour EphA7, une tyrosine kinase réceptrice de la famille Eph/éphrine, qui assure une signalisation dépendante du contact afin de réguler le positionnement cellulaire, l’adhérence et le guidage répulsif au cours du développement. L’activation d’EphA7 influence le remodelage du cytosquelette et des voies en aval telles que la signalisation des GTPases de la famille Rho, MAPK/ERK et des processus dépendants de PI3K, qui façonnent la migration, la formation de frontières et le ciblage axonal. Dans les tissus murins, EphA7 est impliqué dans la mise en place des patrons neuronaux et l’assemblage des circuits, où une signalisation Eph/éphrine altérée peut perturber la connectivité et l’organisation tissulaire. Une dérégulation de la signalisation associée à EphA7 a été étudiée dans des modèles d’anomalies neurodéveloppementales et de biologie tumorale via ses effets sur la prolifération, l’invasion et les interactions avec le microenvironnement.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO EphA7 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Epha7 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Epha7, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Epha7 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine EphA7.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Epha7 pour l'étude de la signalisation de EphA7, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Epha7 essentiels à la fonction de EphA7
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Epha7 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le EphA7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le EphA7 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Epha7. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le EphA7 plasmide HDR (m) et le EphA7 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Epha7 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Epha7 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.