Eos Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402330
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Eos O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Eos, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Eos Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402330 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IKZF4 (Eos) é um fator de transcrição do tipo dedo de zinco da família Ikaros que regula programas de expressão génica que controlam a diferenciação, ativação e tolerância dos linfócitos. Em células T humanas, o Eos é fortemente expresso em células T reguladoras e contribui para manter a identidade supressora ao coordenar a repressão transcricional e o controlo associado à cromatina de genes efetores do sistema imunitário. Por meio da integração com redes transcricionais e epigenéticas, o IKZF4 influencia a responsividade à sinalização por citocinas, os estados de ativação induzidos pelo TCR e a estabilidade de linhagem. A desregulação da função de IKZF4/Eos tem sido associada a alterações na homeostase imunitária e tem sido estudada em contextos de autoimunidade, inflamação e biologia de imunooncologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Eos (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IKZF4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IKZF4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IKZF4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Eos.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IKZF4 para a investigação da sinalização de Eos, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IKZF4 críticos para a função Eos
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IKZF4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Eos Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Eos Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IKZF4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Eos Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Eos (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IKZF4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IKZF4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.