Date published: 2026-7-23

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envoplakin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h): sc-405420-NIC

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데이터 시트
  • Target species: human
  • 20 µg of transfection-ready, purified plasmid DNA; Suitable for up to 20 transfections
  • envoplakin Double Nickase Plasmid (h) 는 한쌍의D10A mutated Cas9 nuclease 와 타깃특정 20 nt guide RNA (gRNA)를 인코딩하는 plasmid를 포함하고있으며 gRNA는 대응 CRISPR/Cas9 KO보다 높은 특이성을 띤 knockout gene을 발현하도록 디자인되였습니다.
  • 한쌍의 gRNA는 약 20bp가량 떨어져 있으며 이는 게놈DNA의 Cas9-mediated double nicking을 발생하여 DSB를 모방합니다.
  • 한쌍의 plasmid 중 하나는 selection에 필요한 puromycin-resistance gene을, 다른하나는 형질주입효율을 확인하는 GFP marker를 보유하고있습니다.
  • envoplakin 더블 니케이스 플라스미드 (h) 및 envoplakin 더블 니케이스 플라스미드 (h2)는 EVPL을 표적하는 서로 다른 쌍을 이루는 gRNA 설계를 암호화합니다. 하나 또는 두 가지 디자인 모두 이용 가능할 수 있습니다
  • Transfection, gene knockout효율은 WB, IF나 IHC등 방법으로 측정할수있습니다, 권장하는 항체는 envoplakin Antibody (F-4): sc-137033
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    주문정보

    제품명카탈로그 번호 단위가격수량관심품목

    envoplakin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h)

    sc-405420-NIC
    20 µg
    $410.00

    envoplakin 더블 틈내기효소 플라스미드 (h2)

    sc-405420-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    EVPL은 층상 상피에서 각질화 세포막(cornified envelope)과 데스모좀 관련 단백질 네트워크 형성에 기여하는 플라킨(plakin) 계열의 세포골격 연결 단백질인 엔보플라킨(envoplakin)을 암호화합니다. 엔보플라킨은 중간섬유를 세포 접합 복합체와 연결해 케라티노사이트 분화, 장벽 형성, 기계적 강도를 뒷받침하며, 세포골격 조직화와 세포–세포 부착 과정과도 연계됩니다. EVPL 발현의 변화 또는 각질화 세포막 조립의 장애는 상피의 취약성 및 비정상적인 분화 프로그램과 관련되어 왔으며, 그 결과 EVPL은 피부 및 점막 항상성을 연구하는 데 유용한 표지자이자 기전적 접근 지점으로 활용됩니다. 암 생물학에서는 종양 진행 과정에서 나타나는 상피 리모델링과 조절 이상이 있는 부착 현상을 이해하기 위해 엔보플라킨 및 관련 각질화 세포막 구성요소들이 자주 분석됩니다.

    envoplakin 더블 니카제 플라스미드(h)는 human 세포주 내 EVPL 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 EVPL 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 EVPL의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

    편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, EVPL 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

    연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.