Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ENT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401603-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ENT1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ENT1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ENT1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC29A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ENT1 Anticorpo (F-12): sc-377283
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ENT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401603-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ENT1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401603-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O SLC29A1 humano codifica o transportador nucleosídico equilibrativo 1 (ENT1), um transportador bidirecional da membrana plasmática que medeia a captação e o efluxo de nucleosídeos de purinas e pirimidinas de forma independente de Na⁺. O ENT1 ajuda a regular os reservatórios intracelulares de nucleosídeos que sustentam as vias de salvamento de purinas/pirimidinas, a síntese de DNA/RNA e a homeostase energética celular por meio do transporte de adenosina. Ao modular a disponibilidade de adenosina extracelular, o ENT1 influencia a sinalização purinérgica e respostas a jusante, como a modulação inflamatória e o tônus vascular. Alterações na atividade do SLC29A1 têm sido associadas na literatura a fenótipos neurocomportamentais e à desregulação, específica de tecidos, da sinalização por adenosina, o que motiva estudos mecanísticos em modelos de células neuronais, imunes e de barreira.
ENT1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC29A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC29A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC29A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC29A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.