Endothelial Lipase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406307
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Endothelial Lipase O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Endothelial Lipase, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Endothelial Lipase Anticorpo (4A9): sc-517036
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Endothelial Lipase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406307 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O LIPG codifica a lipase endotelial (EL), uma fosfolipase A1 secretada e expressa pelo endotélio vascular, que hidrolisa fosfolipídios no HDL circulante e modula a remodelação de lipoproteínas e o transporte de colesterol. Ao regular o catabolismo do HDL e a renovação de fosfolipídios, a EL influencia a homeostase lipídica vascular e se cruza com a sinalização inflamatória em células endoteliais e macrófagos. Alterações na atividade e na expressão de LIPG têm sido associadas a fenótipos relacionados à dislipidemia e a processos relevantes para a aterosclerose, incluindo disfunção endotelial e inflamação vascular impulsionada por lipídios. O LIPG também é estudado por seu impacto em redes extracelulares de lipases com a LPL e a lipase hepática, e por seus efeitos na produção de mediadores lipídicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Endothelial Lipase (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene LIPG em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do LIPG, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do LIPG na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Endothelial Lipase.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de LIPG para a investigação da sinalização de Endothelial Lipase, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) LIPG críticos para a função Endothelial Lipase
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos LIPG para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Endothelial Lipase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Endothelial Lipase Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus LIPG. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Endothelial Lipase Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Endothelial Lipase (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia LIPG para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo LIPG definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.