Elongin A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418260

Visão geral

TCEB3C codifica a Elongin A3 humana, membro do complexo fator de elongação transcricional Elongin, que sustenta a processividade da RNA polimerase II e coordena a transcrição com o controle de qualidade cotranscricional. As proteínas da família Elongin interagem com mecanismos regulatórios dependentes de ubiquitina e ajudam a moldar programas celulares ligados a respostas ao estresse, proteostase e controle do ciclo celular. Como fator associado à transcrição, a Elongin A3 é relevante para estudos de regulação da expressão gênica e de vias de sinalização ligadas à cromatina que influenciam proliferação e diferenciação. A desregulação da elongação transcricional e do controle mediado por ubiquitina é frequentemente implicada em processos oncogênicos e neurodegenerativos, tornando TCEB3C um locus útil para investigação mecanística em modelos relevantes para doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Elongin A3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene TCEB3C em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do TCEB3C, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do TCEB3C na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Elongin A3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de TCEB3C para a investigação da sinalização de Elongin A3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) TCEB3C críticos para a função Elongin A3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos TCEB3C para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Elongin A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Elongin A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus TCEB3C. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Elongin A3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Elongin A3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia TCEB3C para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo TCEB3C definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.