Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Ebi3 Plasmide Double Nickase (h): sc-401552-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Ebi3 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Ebi3 Double Nickase Plasmid (h) e il Ebi3 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira EBI3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Ebi3 Antibody (G-4): sc-166158
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Ebi3 Plasmide Double Nickase (h) | sc-401552-NIC | 20 µg | $410.00 |
EBI3 codifica la proteina Epstein–Barr virus induced gene 3 (Ebi3), una subunità citochinica secreta che forma un eterodimero con p28 dando origine a IL-27 e con p35 dando origine a IL-35, collegando la regolazione dell’immunità innata e adattativa. Attraverso la segnalazione di IL-27/IL-35, Ebi3 influenza programmi trascrizionali mediati da JAK/STAT che modellano la differenziazione delle cellule T, la produzione di citochine infiammatorie e la funzione delle cellule presentanti l’antigene. Un’alterata espressione di EBI3 è stata associata a risposte immunitarie disregolate in contesti autoimmuni e infiammatori ed è frequentemente studiata nell’ambito dell’immunologia dei tumori e delle infezioni croniche. Queste proprietà rendono EBI3 un bersaglio utile per analizzare i circuiti citochinici e le vie immunoregolatorie in modelli cellulari umani.
Ebi3 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus EBI3 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di EBI3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di EBI3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con EBI3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.