Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
EAP30 Antibody (H-3): sc-390748. Western blot analysis of EAP30 expression in HeLa (A), A-673 (B), WI-38 (C), HCT-116 (D), EOC 20 (E) and Sol8 (F) whole cell lysates.
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EAP30 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406312
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- EAP30 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在EAP30基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：EAP30: sc-390747，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
EAP30 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-406312 | 20 µg | $397.00 |
概述
SNF8 编码 EAP30，这是 ESCRT-II 复合体的核心组分之一，负责协调将被泛素化的膜蛋白在内体中分选进入多泡体（MVB），以便在溶酶体中降解。通过依赖 ESCRT 的膜重塑过程，EAP30 支持受体下调、内体-溶酶体运输，并在腔内囊泡形成过程中促进 ESCRT-II 与 ESCRT-III 的耦联。这些过程会影响信号通路的衰减、膜蛋白稳态，以及部分依赖 ESCRT 机制的胞质分裂和病毒出芽。ESCRT 介导的运输失调与生长因子受体信号异常、蛋白质稳态压力以及基因组不稳定性有关，因此 SNF8/EAP30 与癌症生物学及神经退行性疾病相关的内体-溶酶体缺陷研究密切相关。
EAP30 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中SNF8基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对SNF8基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏SNF8开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使EAP30蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建SNF8缺失的细胞模型，用于EAP30信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 EAP30 功能至关重要的 SNF8 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 SNF8 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 EAP30 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 EAP30 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 SNF8 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 EAP30 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 EAP30 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由SNF8同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定SNF8靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。