Dynactin 1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-402369

개요

DCTN1은 다이낙틴 복합체의 주요 p150Glued 소단위인 다이낙틴 1을 암호화하며, 이 복합체는 세포질 다이네인을 화물과 미세소관에 연결해 과정적인 마이너스 말단 방향 수송을 지원합니다. 다이낙틴 1은 다이네인–다이낙틴 모터 조절을 통해 소포 및 세포소기관 수송, 엔도좀–리소좀 위치 결정, 골지체 조직화, 유사분열 방추체 기능, 신경세포 축삭 수송에 기여합니다. 수송과 세포골격 역학을 조율함으로써 DCTN1은 뉴런과 같은 장수명 세포에서 단백질 항상성(proteostasis), 자가포식 흐름(autophagic flux), 스트레스 과립 처리와 관련된 경로에 영향을 미칩니다. DCTN1의 유전적 교란 또는 기능 이상은 신경퇴행성 표현형과 연관되어 있어, 모터 구동 수송 결함과 신경세포 취약성의 기전을 연구하는 데 중요한 표적입니다.

Dynactin 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DCTN1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DCTN1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DCTN1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Dynactin 1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Dynactin 1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DCTN1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Dynactin 1 기능에 중요한 DCTN1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DCTN1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Dynactin 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Dynactin 1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DCTN1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Dynactin 1 HDR 플라스미드 (h) 및 Dynactin 1 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DCTN1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DCTN1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.