dsg3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401809

개요

DSG3는 층상 상피에서 칼슘 의존적 세포–세포 접착을 매개하고, 기계적 스트레스 하에서 조직의 구조적 안정성을 지지하는 데스모좀 카드헤린인 데스모글레인-3을 암호화합니다. dsg3는 데스모플라킨(desmoplakin) 및 플라코글로빈(plakoglobin)과 상호작용하여 중간섬유를 고정하고 접합부의 조직화를 조율함으로써, 데스모좀 조립을 세포골격 재구성과 상피 분화 프로그램에 연결합니다. 접착 의존적 신호전달에서의 역할을 통해 DSG3는 장벽 형성, 세포 극성, 집단 이동과 같은 과정에 영향을 미칩니다. DSG3 발현의 변화 또는 데스모글레인-3을 표적으로 하는 자가항체는 상피의 취약성 및 수포성(물집) 표현형과 연관되어 왔으며, 데스모좀 구성요소의 이상 조절은 상피 종양 생물학에서 자주 연구됩니다.

dsg3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 DSG3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 DSG3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 DSG3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 dsg3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 dsg3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 DSG3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• dsg3 기능에 중요한 DSG3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 DSG3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• dsg3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 dsg3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 DSG3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  dsg3 HDR 플라스미드 (h) 및 dsg3 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 DSG3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 DSG3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.