DSCR 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-402694

概要

RCAN1（DSCR1）はカルシニューリン結合タンパク質をコードしており、カルシニューリンのホスファターゼ活性を調節することで、Ca2+ 依存性シグナル伝達の内因性調節因子として機能します。この相互作用を通じてDSCR1は、ストレス応答、細胞増殖、分化を制御するNFAT駆動性の転写プログラムに影響を与え、MAPK経路や酸化ストレス経路とも交差します。RCAN1の発現は細胞ストレス因子やサイトカインシグナルに応答して変動し、複数組織における転写出力の動的制御と結び付いています。RCAN1活性の異常は神経発生に関わる表現型や、血管・免疫シグナルの変化と関連づけられており、疾患関連の状況における経路バランスの破綻を研究するための機序的手がかりを提供します。

DSCR 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるRCAN1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、RCAN1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、RCAN1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DSCR 1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DSCR 1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、RCAN1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DSCR 1の機能に不可欠なRCAN1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、RCAN1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DSCR 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDSCR 1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、RCAN1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DSCR 1 HDRプラスミド（h）および DSCR 1 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはRCAN1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のRCAN1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。