DNAH5 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407034-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DNAH5O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DNAH5 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DNAH5 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DNAH5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DNAH5 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407034-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DNAH5 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407034-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DNAH5 codifica a cadeia pesada 5 da dineína axonemal, um componente motor central do braço externo de dineína que impulsiona o deslizamento de microtúbulos dependente de ATP dentro do axonema de cílios móveis. No epitélio das vias aéreas humanas, no trato reprodutivo e em células ependimárias, o DNAH5 sustenta o batimento ciliar coordenado necessário para a depuração mucociliar, o fluxo de fluidos e o estabelecimento do eixo corporal esquerda–direita durante o desenvolvimento. Sua função integra-se aos processos de montagem axonemal e de transporte intraflagelar que mantêm a ultraestrutura e o padrão de onda dos cílios. Variantes com perda de função em DNAH5 estão fortemente associadas à discinesia ciliar primária, relacionando a motilidade ciliar comprometida a doença respiratória crônica, defeitos de lateralidade e fenótipos de fertilidade reduzida.
DNAH5 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DNAH5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DNAH5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DNAH5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DNAH5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.