Plasmide Double Nickase (h) DDR1: sc-400517-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) DDR1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide DDR1 Double Nickase (h) et le plasmide DDR1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant DDR1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DDR1 Antibody (C-6): sc-374618
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) DDR1 | sc-400517-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) DDR1 | sc-400517-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDR1 (discoidin domain receptor 1) est une tyrosine kinase réceptrice activée par le collagène, qui agit comme capteur de la matrice extracellulaire en reliant l’engagement du collagène à la signalisation intracellulaire. Lors de son activation, DDR1 s’autophosphoryle et propage des voies impliquées dans l’adhésion cellulaire, le remodelage du cytosquelette, la migration et la survie, avec des interactions documentées avec les voies MAPK/ERK, PI3K–AKT et la signalisation des adhésions focales. L’activité de DDR1 contribue à la régulation des interactions épithélio-stromales, à l’organisation de la membrane basale et au remodelage de la matrice dans l’homéostasie des tissus normaux. Une expression ou une signalisation altérée de DDR1 a été associée à la fibrose ainsi qu’à l’invasion et aux métastases liées aux tumeurs, ce qui en fait un nœud pertinent pour l’étude de phénotypes pilotés par le microenvironnement.
DDR1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus DDR1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de DDR1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de DDR1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de DDR1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.