DC-SIGN Lentiviral Activation Particles (h): sc-401368-LAC

CD209 kodiert DC-SIGN (dendritische-Zell-spezifisches interzelluläres Adhäsionsmolekül‑3‑bindendes Nicht‑Integrin), einen C‑Typ‑Lektinrezeptor, der stark auf dendritischen Zellen und ausgewählten Makrophagenpopulationen exprimiert wird und hochmannosehaltige sowie fukosylierte Glykane erkennt. Durch Ligandenbindung beeinflusst DC‑SIGN die Pathogenerkennung, die Antigenaufnahme, den endosomalen Transport und die Bildung der immunologischen Synapse und ist dabei an Signalprogramme gekoppelt, die eine Raf‑1‑abhängige Modulation von NF‑κB sowie umfassendere transkriptionelle Antworten der angeborenen Immunität umfassen. Dieser Rezeptor ist an der Wechselwirkung mit Toll‑like‑Rezeptor‑Signalwegen beteiligt und prägt das Zytokinprofil, das nachgeschaltet das Priming und die Polarisierung von T‑Zellen beeinflussen kann. Eine fehlregulierte DC‑SIGN‑Aktivität und veränderte Expressionsmuster wurden in Modellen infektiöser Erkrankungen und in entzündlichen Kontexten mit veränderten Wirt‑Pathogen‑Interaktionen und einem Umbau des Immunmikromilieus in Verbindung gebracht.

DC-SIGN Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CD209-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

DC-SIGN Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CD209-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen DC-SIGN-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CD209-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.