CD96 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407300

Übersicht

CD96 ist ein Typ‑I‑Transmembranrezeptor der Immunglobulin-Superfamilie, der vor allem auf T‑Zellen und NK‑Zellen exprimiert wird und dort die Bildung der immunologischen Synapse sowie die zytotoxische Effektorfunktion moduliert. Über Interaktionen innerhalb des Nectin/Nectin‑like‑Netzwerks ist CD96 an Adhäsion und ko‑inhibitorischer Signalgebung beteiligt und beeinflusst Signalwege, die Aktivierungsschwellen und die Zytokinproduktion feinjustieren. Die Funktion von CD96 überschneidet sich mit der Regulation von Immun-Checkpoints neben Rezeptoren wie TIGIT und CD226 und prägt so die Antworten auf gestresste oder transformierte Zellen im Tumormikromilieu. Eine dysregulierte CD96‑Aktivität und -Expression wurde mit veränderter antitumoraler Immunität, chronischer Entzündung und Mechanismen der Immunflucht in Verbindung gebracht, was für die Onkologie- und Immunologieforschung relevant ist.

Das CD96 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des CD96-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des CD96-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von CD96 nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die CD96-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von CD96-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der CD96-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf CD96-Exone abzielen, die für die CD96-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere CD96-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom CD96 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom CD96 CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des CD96-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das CD96 HDR-Plasmid (h) und CD96 HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von CD96-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten CD96-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.