CD55 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400738-LAC

CD55 (Decay-Accelerating Factor, DAF) ist ein über Glycosylphosphatidylinositol (GPI) verankerter Regulator der Komplementkaskade auf der Zelloberfläche, der C3/C5-Konvertasen destabilisiert und so die Komplementamplifikation auf Wirtsmembranen begrenzt. Durch die Kontrolle der Komplementaktivierung beeinflusst CD55 die angeborene Immunüberwachung, inflammatorische Signalwege und Zell‑Zell‑Interaktionen an der immunologischen Synapse und kann die Anfälligkeit für komplementabhängigen Stress modulieren. Eine veränderte CD55-Expression wurde mit Immundysregulation und entzündlicher Pathobiologie in Verbindung gebracht und wird häufig im Zusammenhang mit komplementvermittelten Gewebeschädigungen und Mechanismen der Tumor‑Immunflucht untersucht. Als breit exprimiertes Membranprotein wird CD55 außerdem als Marker in Studien zum Transport von Zelloberflächen‑Glykoproteinen und zur Organisation von Mikrodomainen verwendet.

CD55 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CD55-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD55 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CD55-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD55-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CD55-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.