CD20 Lentiviral Activation Particles (h): sc-416765-LAC

MS4A1 kodiert CD20, ein tetraspanes Membranprotein, das auf Zellen der B‑Zell‑Linie stark exprimiert wird und den Kalziumfluss sowie die B‑Zell‑Rezeptor(BCR)-abhängige Signalübertragung reguliert. CD20 trägt über Signalwege, die mit der PI3K–AKT-, NF‑κB- und MAPK-Signalgebung verknüpft sind, zur Aktivierung, Proliferation und Differenzierung von B‑Zellen bei und moduliert antigengetriebene Antworten. Eine veränderte MS4A1/CD20-Expression ist eng mit der Identität der B‑Zell‑Linie und Zuständen des immunologischen Mikromilieus verbunden und stellt daher ein häufig untersuchtes molekulares Merkmal in Modellen von B‑Zell‑Malignomen sowie bei autoimmunassoziierter B‑Zell‑Dysregulation dar. Folglich dient MS4A1 als nützlicher Knotenpunkt, um B‑Zell‑Signalnetzwerke, Linienübergänge und immunphänotypische Heterogenität in menschlichen Zellsystemen zu untersuchen.

CD20 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente MS4A1-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD20 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der MS4A1-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD20-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen MS4A1-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.