Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD163 (m): sc-429989
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- CD163 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique CD163, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: CD163 Antibody (ED2): sc-58965
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO CD163 (m) | sc-429989 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Cd163 code CD163, un récepteur scavenger enrichi dans les macrophages et les monocytes, qui se lie aux complexes hémoglobine–haptoglobine et en favorise l’endocytose et la clairance, reliant le recyclage du fer aux programmes inflammatoires de phase de résolution. CD163 participe à la régulation de l’immunité innée via le trafic endocytique et la modulation des réponses cytokiniques, et il est fréquemment associé à des phénotypes de macrophages activés de façon alternative dans des contextes de réparation tissulaire. Dans des modèles murins, des populations myéloïdes CD163-positives sont utilisées pour étudier les microenvironnements inflammatoires, la polarisation des macrophages et le dialogue croisé myéloïde–stromal dans des affections inflammatoires chroniques et fibrosantes. Des altérations de l’expression de Cd163 ont également été exploitées comme marqueur d’états macrophagiques pertinents pour la maladie dans des contextes tels que l’infection, l’inflammation métabolique et la biologie myéloïde associée aux tumeurs.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO CD163 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Cd163 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Cd163, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Cd163 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine CD163.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Cd163 pour l'étude de la signalisation de CD163, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Cd163 essentiels à la fonction de CD163
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Cd163 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le CD163 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le CD163 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Cd163. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le CD163 plasmide HDR (m) et le CD163 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Cd163 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Cd163 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.