cathepsin S CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419881

개요

Ctss는 마우스 카텝신 S(cathepsin S)를 암호화하며, 카텝신 S는 리소좀에 존재하는 시스테인 프로테아제로서 항원제시세포에서 두드러지게 발현되어 내부화된 단백질의 단백질분해적 처리 과정을 주도합니다. 카텝신 S는 불변사슬(invariant chain)을 절단해 펩타이드 적재를 가능하게 함으로써 MHC class II 항원제시 경로의 핵심 구성요소로 작용하며, 엔도리소좀 단백질 항상성(proteostasis)과 적응면역 활성화를 연결합니다. 항원 처리 외에도 카텝신 S는 골수계 계통에서 세포외기질(ECM) 턴오버와 염증성 신호전달에 기여하여, 백혈구 이동과 조직 리모델링 연구에 활용됩니다. CTSS 활성의 조절 이상은 면역매개 병리와 만성 염증 상태와 연관되어 왔으며, 이에 따라 면역학 및 염증 모델에서 기전 연구의 필요성이 제기됩니다.

cathepsin S CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Ctss 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Ctss 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Ctss의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 cathepsin S 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 cathepsin S 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Ctss 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• cathepsin S 기능에 중요한 Ctss 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Ctss 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• cathepsin S CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 cathepsin S CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Ctss 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  cathepsin S HDR 플라스미드 (m) 및 cathepsin S HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Ctss 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Ctss 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.