calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-403375
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在calsequestrin 1基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：calsequestrin 1: sc-137080，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-403375 | 20 µg | $397.00 |
概述
CASQ1 编码肌钙集蛋白 1（calsequestrin 1），这是一种高容量的 Ca²⁺ 结合蛋白，定位于骨骼肌肌浆网（sarcoplasmic reticulum, SR）腔内，在其中缓冲 Ca²⁺ 并帮助塑造兴奋–收缩耦联过程。通过与雷诺定受体复合体及终池/连接区 SR 组分相互作用，CASQ1 支持 Ca²⁺ 释放与再摄取的动态平衡，从而调控肌肉收缩能力、抗疲劳性以及肌纤维稳态。CASQ1 依赖的 Ca²⁺ 处理一旦受扰，可能与细胞内 Ca²⁺ 信号异常、氧化应激反应以及 SR 结构重塑相关。遗传学与功能学研究提示，CASQ1 与恶性高热样表型的易感性以及其他以 Ca²⁺ 储存受损和 Ca²⁺ 释放失调为特征的骨骼肌疾病有关。
calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中CASQ1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对CASQ1基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏CASQ1开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使calsequestrin 1蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建CASQ1缺失的细胞模型，用于calsequestrin 1信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 calsequestrin 1 功能至关重要的 CASQ1 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 CASQ1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 calsequestrin 1 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 CASQ1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 calsequestrin 1 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 calsequestrin 1 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由CASQ1同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定CASQ1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。