Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Calretinin Double Nickase Plasmid (h): sc-401389-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Calretinin Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Calretinin Double-Nickase-Plasmid (h) und Calretinin Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf CALB2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Calretinin: sc-365956
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Calretinin Double Nickase Plasmid (h) | sc-401389-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Calretinin Double Nickase Plasmid (h2) | sc-401389-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Humanes **CALB2** kodiert **Calretinin**, ein EF‑Hand‑Calcium-bindendes Protein, das intrazelluläres Ca2+ puffert und die calciumabhängige Erregbarkeit, synaptische Transmission sowie die aktivitätsabhängige Genregulation mitprägt. Calretinin ist in bestimmten Interneuronenpopulationen angereichert und wird zudem in ausgewählten peripheren Geweben exprimiert, wo es über Ca2+-regulierte Signalwege zu Zytoskelettdynamik und vesikulärem Transport beiträgt. **CALB2** wird häufig als molekularer Marker für neuronale Subtyp-Identität und mesotheliale Differenzierung verwendet und verknüpft seine Expression mit Studien zur Organisation neuronaler Schaltkreise und zu epithelialen Linienprogrammen. Eine fehlregulierte **CALB2**-Expression und veränderte Calciumhomöostase wurden mit neuroentwicklungs- und neurodegenerativen Zusammenhängen sowie mit der Tumorbiologie in bestimmten Gewebetypen in Verbindung gebracht, was seinen Nutzen für mechanistische Forschung unterstreicht.
Calretinin Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des CALB2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von CALB2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die CALB2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit CALB2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.