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BAP31慢病毒激活颗粒(h) | sc-402421-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
BAP31慢病毒激活颗粒(h2) | sc-402421-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
BCAP31 编码 BAP31,这是一种内质网(ER)膜整合型分子伴侣,可协调膜蛋白的生物发生、ER 质量控制以及 ER 与高尔基体之间的囊泡运输。BAP31 参与新生客户蛋白的处理与输出,并通过影响半胱天冬酶(caspase)激活和线粒体通路的相互作用,将 ER 稳态与凋亡信号连接起来。由于其在蛋白质稳态与细胞内运输中的作用,BCAP31 常在细胞应激反应、免疫相关信号以及受调控细胞死亡的研究背景下被关注。涉及 BAP31 的 ER 相关折叠与运输过程发生失调,与一些病理生理状态相关,这些状态中常存在蛋白毒性应激及异常凋亡等因素。
BAP31 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 BCAP31 表达。
BAP31 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在BCAP31转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性BAP31表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 BCAP31 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。