AVP Receptor V1a Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-401691

Descripción general

AVPR1A codifica el receptor V1a de la vasopresina arginina, un GPCR de tipo rodopsina que se acopla principalmente a Gq/11 para activar la fosfolipasa C, generando señales de IP3/DAG que elevan el Ca²⁺ intracelular y estimulan programas de transcripción dependientes de PKC. La señalización del receptor V1a regula la contracción del músculo liso vascular, la reactividad plaquetaria, la glucogenólisis hepática y circuitos neuromoduladores implicados en conductas sociales y relacionadas con el estrés. En las células, la actividad de AVPR1A se interseca con la señalización MAPK/ERK, la regulación génica dependiente de calcio y la remodelación del citoesqueleto que influyen en la contractilidad y la migración. La desregulación de la señalización vasopresina–V1a se ha investigado en fenotipos cardiovasculares y metabólicos y en asociaciones con rasgos neuropsiquiátricos, lo que respalda estudios mecanísticos de la función del receptor en distintos contextos tisulares.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO AVP Receptor V1a (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen AVPR1A en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del AVPR1A junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de AVPR1A tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína AVP Receptor V1a.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en AVPR1A para la investigación de la señalización de AVP Receptor V1a, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de AVPR1A críticos para la función de AVP Receptor V1a
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de AVPR1A para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido AVP Receptor V1a CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido AVP Receptor V1a CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus AVPR1A. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR AVP Receptor V1a (h) y el plásmido HDR AVP Receptor V1a (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología AVPR1A para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana AVPR1A definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.