Plasmide Double Nickase (h) AVP: sc-403139-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) AVP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide AVP Double Nickase (h) et le plasmide AVP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant AVP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) AVP | sc-403139-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) AVP | sc-403139-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
L’arginine-vasopressine (AVP) code une hormone peptidique neurohypophysaire synthétisée sous forme de prépropressophysine dans les neurones magnocellulaires de l’hypothalamus, puis maturée en AVP, neurophysine II et copeptine. L’AVP transmet principalement son signal via les récepteurs AVPR1A/AVPR1B (voies Gq/PLCβ–IP3/Ca2+ et PKC) et AVPR2 (voie Gs/cAMP–PKA) afin de réguler la réabsorption rénale de l’eau par le trafic de l’aquaporine‑2, le tonus vasculaire et la libération hypophysaire d’ACTH dans des circuits sensibles au stress. Par ces voies, l’AVP contribue à l’osmorégulation systémique, au contrôle hémodynamique et à l’intégration neuroendocrinienne. Une dérégulation de la production d’AVP ou de la signalisation de ses récepteurs est impliquée dans des troubles de l’équilibre hydrique et de l’homéostasie du sodium, et une activité altérée de l’axe AVP est également étudiée dans des phénotypes liés au stress ainsi que dans certains contextes tumoraux.
AVP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus AVP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de AVP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de AVP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de AVP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.