ATP-citrate synthase CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-430516

개요

마우스 Acly 유전자는 ATP-시트르산 합성효소(ACLY)를 암호화한다. ACLY는 세포질에 존재하는 효소로, 시트르산과 CoA를 아세틸‑CoA와 옥살로아세트산으로 전환하여 미토콘드리아의 탄소 흐름을 세포질 대사와 연결한다. ACLY는 de novo 지방산 및 콜레스테롤 합성에 필요한 아세틸‑CoA를 공급함으로써 지질합성과 막 생합성을 뒷받침하며, 단백질 및 히스톤 아세틸화에 사용되는 아세틸‑CoA 풀에도 기여한다. 이러한 활성은 영양분 감지를 해당과정–TCA 회로 연계, 지질 항상성, 그리고 유전자 발현의 후성유전적 조절을 통제하는 경로들과 통합한다. ACLY 의존적 아세틸‑CoA 생성이 비정상적으로 조절될 경우, 질환 관련 모델에서 대사 재편의 변화, 염증성 신호전달, 그리고 증식과 연관된 표현형과의 관련성이 보고되어 왔다.

ATP-citrate synthase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Acly 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Acly 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Acly의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 ATP-citrate synthase 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 ATP-citrate synthase 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Acly 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• ATP-citrate synthase 기능에 중요한 Acly 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Acly 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• ATP-citrate synthase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 ATP-citrate synthase CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Acly 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  ATP-citrate synthase HDR 플라스미드 (m) 및 ATP-citrate synthase HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Acly 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Acly 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.