Aquaporin 3/AQP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419174

Visão geral

Aqp3 codifica a aquaporina 3 (AQP3), um canal de membrana plasmática do tipo aquagliceroporina que facilita o transporte transmembranar de água, glicerol e outros pequenos solutos, influenciando o equilíbrio osmótico celular e a disponibilidade de substratos metabólicos. Em tecidos de camundongo como rim, pele e epitélio gastrointestinal, a AQP3 contribui para a hidratação da barreira epitelial, a regulação de volume e o metabolismo energético dependente de glicerol, conectando o transporte de membrana à adaptação ao estresse e à proliferação. A atividade da AQP3 pode modular a sinalização relacionada ao estado redox por meio de efeitos no fluxo intracelular de solutos e é frequentemente estudada em contextos de homeostase epitelial, inflamação e remodelamento. A expressão ou a localização desregulada de AQP3 tem sido associada a alterações no reparo de feridas e a fenótipos inflamatórios cutâneos, sustentando sua relevância para estudos mecanísticos da função de barreira e da disfunção epitelial associada a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Aquaporin 3/AQP3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Aqp3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Aqp3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Aqp3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Aquaporin 3/AQP3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Aqp3 para a investigação da sinalização de Aquaporin 3/AQP3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Aqp3 críticos para a função Aquaporin 3/AQP3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Aqp3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Aquaporin 3/AQP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Aquaporin 3/AQP3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Aqp3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Aquaporin 3/AQP3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Aquaporin 3/AQP3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Aqp3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Aqp3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.