Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
APPL1 Antibody (A-1) Alexa Fluor® 647: sc-271901 AF647. Direct fluorescent western blot analysis of APPL1 expression in MDA-MB-231 (A), ES-2 (B), PC-12 (C) and 3T3-L1 (D) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214. Cruz Marker™ Molecular Weight Standards detected with Cruz Marker™ MW Tag-Alexa Fluor® 488: sc-516790.
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APPL1双切口酶质粒(m): sc-428481-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- APPL1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- APPL1双切酶质粒（m）和APPL1双切酶质粒（m2）编码针对Appl1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：APPL1: sc-271901，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
APPL1双切口酶质粒(m) | sc-428481-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
APPL1双切口酶质粒(m2) | sc-428481-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Appl1 编码 APPL1，这是一种内体适配蛋白，可与 Rab5 结合，并将受体酪氨酸激酶的信号与下游 PI3K–AKT 和 MAPK 通路整合起来。通过与脂联素受体及胰岛素信号组分的相互作用，APPL1 参与调控葡萄糖摄取、脂质代谢以及细胞生长相关反应。APPL1 还参与内吞转运与信号的区室化，从而影响细胞存活、迁移以及神经元信号程序。文献报道显示，APPL1 相关信号的失衡与代谢表型及生长因子反应异常有关，提示其在胰岛素抵抗、肥胖相关通路以及信号驱动的疾病机制研究中具有重要意义。
APPL1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Appl1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Appl1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Appl1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Appl1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。