Angiomotin-L2 Double Nickase Plasmid (m): sc-425094-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Angiomotin-L2 Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Angiomotin-L2 Double-Nickase-Plasmid (m) und Angiomotin-L2 Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Amotl2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
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| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Angiomotin-L2 Double Nickase Plasmid (m) | sc-425094-NIC | 20 µg | $410.00 |
Amotl2 kodiert Angiomotin-like 2 (Angiomotin-L2), ein Gerüstprotein an Zellkontakten, das Polarität, Umgestaltung des Aktinzytoskeletts sowie die endotheliale und epitheliale Morphogenese koordiniert. Angiomotin-L2 greift in die Hippo-Signalweg-Kontrolle der YAP/TAZ-Lokalisation und der transkriptionellen Aktivität ein und verknüpft so Spannung an Zellkontakten und Zelldichte mit Programmen für Proliferation und Migration. In Mausmodellen wird Amotl2 im Kontext der Gefäßentwicklung, der Barriere-Regulation und des Gewebeumbaus untersucht; dabei werden Fehlregulationen der Signalübertragung an Zellkontakten und der Mechanotransduktion mit pathologischer Angiogenese und tumorassoziierten Invasionsphänotypen in Verbindung gebracht. Diese Funktionen machen Amotl2 zu einem nützlichen Knotenpunkt, um Kontaktinhibition, die Dynamik der Zell-Zell-Adhäsion und Signalnetzwerke der Migration zu untersuchen.
Angiomotin-L2 Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Amotl2-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Amotl2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Amotl2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Amotl2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.