Androgen Receptor Plasmide Double Nickase (m): sc-419181-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Androgen Receptor Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Androgen Receptor Double Nickase Plasmid (m) e il Androgen Receptor Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Ar. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: Androgen Receptor Antibody (AN1-15): sc-56824
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Androgen Receptor Plasmide Double Nickase (m) | sc-419181-NIC | 20 µg | $410.00 |
Mouse Ar codifica il recettore degli androgeni (AR), un recettore nucleare attivato dal legando che lega gli androgeni e regola programmi trascrizionali che controllano lo sviluppo, la fisiologia riproduttiva e l’omeostasi dei tessuti. Una volta attivato, AR trasloca nel nucleo, si lega agli elementi di risposta agli androgeni e coopera con rimodellatori della cromatina e co-regolatori per modulare l’espressione genica in vie che governano la progressione del ciclo cellulare, la differenziazione e il metabolismo. La segnalazione di AR interseca le reti PI3K/AKT, MAPK e Wnt/β-catenina, integrando segnali ormonali con risposte alla crescita e allo stress. Un’attività di AR deregolata e un’espressione alterata del recettore sono ampiamente utilizzate come modelli meccanicistici nella biologia ormone-responsiva, inclusi studi su disturbi riproduttivi e sulla tumorigenesi guidata dal sistema endocrino in modelli murini.
Androgen Receptor Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Ar nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Ar. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Ar. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Ar interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.