amphiregulin Lentiviral Activation Particles (m): sc-419185-LAC

Das Mausgen **Areg** kodiert **Amphiregulin**, einen sezernierten Liganden aus der Familie der epidermalen Wachstumsfaktoren (EGF), der an **EGFR/ErbB** bindet und dessen Signalwege aktiviert, um die Proliferation, das Überleben und die Differenzierung epithelialer und stromaler Zellen zu regulieren. Die Induktion von Amphiregulin ist häufig mit Programmen des Gewebeumbaus verknüpft, darunter Wundheilung, Aufrechterhaltung der Barrierefunktion und Entzündungsreaktionen, wobei nachgeschaltet insbesondere die **MAPK/ERK-** und **PI3K/AKT**-Signalwege aktiviert werden. Im Immunmikromilieu kann Amphiregulin von aktivierten Leukozytensubpopulationen produziert werden und trägt zur parakrinen Kommunikation zwischen Immun- und Epithelkompartimenten bei. Eine dysregulierte **Areg**-Expression wird u. a. im Kontext chronischer Entzündungen, Fibrose und Tumorbiologie untersucht, wo EGFR-getriebene Signalgebung den Zellzustand und die Dynamik des Mikromilieus beeinflusst.

amphiregulin Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Areg-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

amphiregulin Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Areg-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen amphiregulin-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Areg-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.