Date published: 2026-7-10

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AMID/AIFM2/FSP1双切口酶质粒(m): sc-427933-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • AMID/AIFM2/FSP1 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • AMID/AIFM2/FSP1双切酶质粒(m)和AMID/AIFM2/FSP1双切酶质粒(m2)编码针对Aifm2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:AMID/AIFM2/FSP1: sc-377120,通过WB, IF或者IHC分析
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    AMID/AIFM2/FSP1双切口酶质粒(m)

    sc-427933-NIC
    20 µg
    $410.00

    小鼠 Aifm2 编码 AMID/AIFM2/FSP1,这是一种黄素蛋白氧化还原酶,参与细胞氧化还原稳态控制与应激反应。FSP1 作为一种 NAD(P)H 依赖性的氧化还原酶,支持膜上 CoQ10 的再生,从而有助于抑制脂质过氧化并调控细胞对铁死亡(ferroptosis)的敏感性。AMID 也与线粒体和细胞核的应激信号传导有关;据报道,其在不同情境下可参与与凋亡相关的通路。AIFM2/FSP1 相关的氧化还原与细胞死亡程序发生失调,与氧化损伤、神经退行性变、缺血-再灌注生物学以及癌细胞生存机制等研究密切相关。

    AMID/AIFM2/FSP1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Aifm2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Aifm2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Aifm2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Aifm2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。