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AMID/AIFM2/FSP1双切口酶质粒(m) | sc-427933-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Aifm2 编码 AMID/AIFM2/FSP1,这是一种黄素蛋白氧化还原酶,参与细胞氧化还原稳态控制与应激反应。FSP1 作为一种 NAD(P)H 依赖性的氧化还原酶,支持膜上 CoQ10 的再生,从而有助于抑制脂质过氧化并调控细胞对铁死亡(ferroptosis)的敏感性。AMID 也与线粒体和细胞核的应激信号传导有关;据报道,其在不同情境下可参与与凋亡相关的通路。AIFM2/FSP1 相关的氧化还原与细胞死亡程序发生失调,与氧化损伤、神经退行性变、缺血-再灌注生物学以及癌细胞生存机制等研究密切相关。
AMID/AIFM2/FSP1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Aifm2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Aifm2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Aifm2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Aifm2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。