Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2 Double Nickase Plasmid (h): sc-400809-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2 Double-Nickase-Plasmid (h) und Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ALDH2 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2: sc-100496
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2 Double Nickase Plasmid (h) | sc-400809-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-400809-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ALDH2 kodiert das mitochondriale Enzym Aldehyddehydrogenase 2, einen wichtigen Katalysator der NAD(P)+-abhängigen Oxidation reaktiver Aldehyde, die beim Ethanolstoffwechsel und bei der Lipidperoxidation entstehen. Durch den Abbau von Acetaldehyd und toxischen, lipidabgeleiteten Aldehyden wie 4‑Hydroxynonenal unterstützt ALDH2 das mitochondriale Redoxgleichgewicht, begrenzt oxidativen Stress und schützt Proteine und Membranen vor der Bildung von Aldehydaddukten. Die ALDH2-Aktivität ist mit der mitochondrialen Qualitätskontrolle, der ROS-Signalübertragung sowie umfassenderen Wegen des Xenobiotika- und des intermediären Stoffwechsels verknüpft. Eine veränderte ALDH2-Funktion wurde mit einer unterschiedlichen Anfälligkeit für aldehydinduzierte zelluläre Schädigungen in Verbindung gebracht und wird häufig in Kontexten wie alkoholbedingtem Gewebestress, kardiometabolischen Phänotypen und Mechanismen neurodegenerativer Erkrankungen untersucht.
Aldehyde dehydrogenase 2/ALDH2 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ALDH2-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ALDH2 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ALDH2-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ALDH2-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.