Partículas Lentivirales de Activación (m) Ah Receptor: sc-419054-LAC

El gen **Ahr** de ratón codifica el receptor de hidrocarburos de arilo (AhR), un factor de transcripción activado por ligando que actúa como un sensor ambiental central, vinculando la exposición a xenobióticos con la reprogramación transcripcional. Tras su activación, AhR se transloca al núcleo, forma un heterodímero con ARNT y se une a elementos de respuesta a xenobióticos para regular genes implicados en el metabolismo de fase I/II, como las enzimas del citocromo P450, interactuando con vías de señalización de estrés oxidativo e inflamación. Más allá de la desintoxicación, AhR influye en la diferenciación de células inmunitarias, el mantenimiento de la barrera epitelial y procesos del desarrollo mediante el diálogo cruzado con NF-κB, Wnt/β-catenina y redes reguladoras circadianas. La señalización de AhR desregulada se ha implicado en respuestas toxicológicas y fenotipos inflamatorios, y se estudia con frecuencia en contextos como la disfunción de barrera, la patología mediada por el sistema inmune y programas transcripcionales asociados a la carcinogénesis.

Las partículas de activación lentiviral Ah Receptor (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Ahr en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Ah Receptor (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Ahr, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Ah Receptor. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Ahr y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.