Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Lentiviral Activation Particles (m): sc-430515-LAC

Das murine Gen *Adcy3* kodiert die Adenylatcyclase 3 (AC3/ADCY3), ein membranassoziiertes Enzym, das ATP in zyklisches AMP (cAMP) umwandelt und damit die GPCR-Signalübertragung an nachgeschaltete, PKA- und CREB-abhängige Transkriptionsprogramme koppelt. AC3 trägt zur sensorischen und neuroendokrinen Signalübertragung bei, einschließlich der olfaktorischen Transduktion sowie der cAMP-regulierten Kontrolle von Zellstoffwechsel und Differenzierung. Durch die Prägung kompartimentierter cAMP-Dynamiken beeinflusst ADCY3 Prozesse wie neuronale Erregbarkeit, hormonelle Antwortwege und die Energiehomöostase. Eine Fehlregulation der ADCY3-gekoppelten Signalübertragung wurde in genetischen und funktionellen Studien mit metabolischen Phänotypen und neurobehavioralen Merkmalen in Verbindung gebracht, was ihre Relevanz in Modellen zu Adipositas, Insulinsensitivität und sensorischen Funktionsstörungen unterstreicht.

Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente Adcy3-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3 Lentivirale Aktivierungspartikel (m) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der Adcy3-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen Adenylate cyclase 3/AC3/ADCY3-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen Adcy3-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.