adenosine deaminase Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402201-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- adenosine deaminaseO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase adenosine deaminase (h) e o Plasmídeo Double Nickase adenosine deaminase (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ADA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:adenosine deaminase Anticorpo (D-4): sc-28346
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
adenosine deaminase Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402201-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
adenosine deaminase Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402201-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A ADA humana codifica a adenosina desaminase, uma enzima-chave do metabolismo de purinas que desamina irreversivelmente a adenosina e a desoxiadenosina em derivados de inosina, ajudando a manter o equilíbrio do pool de nucleotídeos. Ao controlar os níveis intra e extracelulares de adenosina, a ADA influencia as vias de salvamento, a capacidade de síntese de DNA e a sinalização ligada a receptores de adenosina, que molda a ativação e a diferenciação de células imunes. A atividade da ADA está intimamente associada ao desenvolvimento de linfócitos e à capacidade proliferativa, e alterações na função da ADA estão fortemente ligadas a fenótipos de imunodeficiência e a uma desregulação imune mais ampla. Como resultado, a ADA é amplamente estudada na biologia de leucócitos, nas respostas ao estresse de nucleotídeos e em redes de sinalização relacionadas à inflamação.
adenosine deaminase O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ADA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ADA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ADA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ADA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.