ACADVL (VLCAD) Lentiviral Activation Particles (h): sc-403111-LAC

ACADVL kodiert die Very-long-chain-Acyl-CoA-Dehydrogenase (VLCAD), ein mitochondriales Flavoprotein, das den ersten Dehydrierungsschritt in der β‑Oxidation langkettiger Fettsäure‑Acyl‑CoAs katalysiert. VLCAD unterstützt die Energiegewinnung aus Fettsäuren und trägt zum mitochondrialen Redoxgleichgewicht sowie zur metabolischen Flexibilität in Geweben mit hohem oxidativem Bedarf wie Herz- und Skelettmuskel bei. Eine Störung oder verminderte Aktivität von ACADVL ist mit einer beeinträchtigten Oxidation langkettiger Fettsäuren, veränderten Acylcarnitin‑Profilen und mitochondrialen Stressantworten assoziiert. Diese metabolischen Defekte werden im Kontext erblicher Störungen der Fettsäureoxidation sowie in der breiteren Forschung zu kardiometabolischen Dysfunktionen und Mechanismen mitochondrialer Erkrankungen untersucht.

ACADVL Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente ACADVL-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

ACADVL Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der ACADVL-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen ACADVL-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen ACADVL-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.