Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ABHD5 Double Nickase Plasmid (h): sc-402273-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das ABHD5 Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- ABHD5 Double-Nickase-Plasmid (h) und ABHD5 Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf ABHD5 abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: ABHD5: sc-376931
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
ABHD5 Double Nickase Plasmid (h) | sc-402273-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ABHD5 Double Nickase Plasmid (h2) | sc-402273-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ABHD5 (auch bekannt als CGI-58) kodiert einen mit Lipidtröpfchen assoziierten Koaktivator, der die adipöse Triglyceridlipase (PNPLA2/ATGL) stimuliert und die intrazelluläre Hydrolyse von Triglyceriden fördert. Über die Regulation von Lipolyse, Fettsäuremobilisierung und der Dynamik von Lipidtröpfchen beeinflusst ABHD5 die Energiehomöostase sowie nachgeschaltete Signalwege, die mit der mitochondrialen β‑Oxidation und zellulären Stressantworten verknüpft sind. Eine Störung des ABHD5‑abhängigen Lipidabbaus ist mit Phänotypen der Neutralfetteinlagerung assoziiert und wurde mit metabolischer Dysregulation in Leber-, Haut- und Muskelgeweben in Verbindung gebracht. Als zentrale Schaltstelle des Lipidstoffwechsels wird ABHD5 häufig im Kontext von Lipidspeicherkrankheiten, entzündungsassoziierten Stoffwechselwegen und zelltypspezifischem Lipidtröpfchen‑Remodeling untersucht.
ABHD5 Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des ABHD5-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von ABHD5 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die ABHD5-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit ABHD5-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.