ABHD2 Plasmide Double Nickase (h): sc-411559-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ABHD2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ABHD2 Double Nickase Plasmid (h) e il ABHD2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ABHD2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ABHD2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411559-NIC | 20 µg | $410.00 |
ABHD2 (abhydrolase domain containing 2) codifica un’idrolasi serinica umana associata a compartimenti di membrana, dove contribuisce al metabolismo dei lipidi e alla segnalazione mediata da lipidi. In quanto membro della famiglia enzimatica con fold α/β-idrolasi, l’attività di ABHD2 si intreccia con vie che regolano lipidi bioattivi, composizione delle membrane e risposte a valle di secondi messaggeri, influenzando la segnalazione cellulare e la regolazione dei canali ionici. L’espressione e la funzione enzimatica di ABHD2 sono state investigate nel contesto della biologia riproduttiva e di più ampi fenotipi metabolici e di segnalazione, in cui una gestione disfunzionale dei lipidi può contribuire a stati cellulari associati a patologie. Queste caratteristiche rendono ABHD2 un bersaglio utile per studi che collegano l’enzimologia dei lipidi alle reti di segnalazione e alla modulazione del fenotipo in modelli cellulari umani.
ABHD2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ABHD2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ABHD2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ABHD2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ABHD2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.