Plásmido Doble Nickase (h) ABHD2: sc-411559-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ABHD2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ABHD2 (h) y el plásmido de doble nickasa ABHD2 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ABHD2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ABHD2 | sc-411559-NIC | 20 µg | $410.00 |
ABHD2 (dominio de abhidrolasa que contiene 2) codifica una hidrolasa de serina humana asociada a compartimentos de membrana, donde contribuye al metabolismo de lípidos y a la señalización derivada de lípidos. Como miembro de la familia de enzimas con pliegue α/β‑hidrolasa, la actividad de ABHD2 se integra en vías que regulan lípidos bioactivos, la composición de la membrana y respuestas posteriores de segundos mensajeros que influyen en la señalización celular y la regulación de canales iónicos. La expresión y la función enzimática de ABHD2 se han investigado en el contexto de la biología reproductiva y de fenotipos metabólicos y de señalización más amplios, en los que una gestión desregulada de los lípidos puede contribuir a estados celulares asociados a enfermedad. Estas características hacen de ABHD2 una diana útil para estudios que vinculan la enzimología de lípidos con redes de señalización y la modulación de fenotipos en modelos celulares humanos.
ABHD2 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ABHD2 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ABHD2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ABHD2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ABHD2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.