ABCG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-418933

概要

Abcg1はATP結合カセット（ABC）トランスポーターであるABCG1をコードしており、細胞内のコレステロールおよびリン脂質の恒常性を制御する主要な調節因子です。ABCG1はHDLへのステロール排出を促進し、膜脂質のリモデリングを支えます。マクロファージなど脂質を取り扱う細胞では、ABCG1はLXR/RXRシグナル伝達の下流で機能し、ABCA1と協調して脂質負荷、泡沫細胞形成、炎症のトーンを制御します。マウスモデルでは、Abcg1活性の変化が脂質代謝の破綻、酸化ストレス応答、ならびに動脈硬化に関連する表現型と関連づけられています。さらに、ABCG1が介在する脂質バランスは、免疫細胞機能や代謝ストレスに対する細胞応答にも影響し得ます。

ABCG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるAbcg1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Abcg1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Abcg1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ABCG1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ABCG1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Abcg1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ABCG1の機能に不可欠なAbcg1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Abcg1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ABCG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびABCG1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Abcg1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ABCG1 HDRプラスミド（m）および ABCG1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはAbcg1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のAbcg1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。