Plasmide CRISPR/Cas9 KO ABCA2 (m): sc-418931
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- ABCA2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique ABCA2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: ABCA2 Antibody (9A2): sc-130575
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO ABCA2 (m) | sc-418931 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Abca2 code ABCA2, un transporteur de la famille ABC (ATP‑binding cassette) principalement localisé aux membranes endolysosomales dans les cellules de souris, où il contribue au métabolisme intracellulaire des lipides et au trafic vésiculaire. ABCA2 a été associé à la régulation de l’homéostasie du cholestérol et des sphingolipides, influençant la composition membranaire et des processus tels que l’endocytose, la fonction lysosomale et la biologie des lipides liés à la myéline. Une activité ABCA2 altérée a été mise en relation, dans des systèmes expérimentaux, avec la biologie neuronale et gliale, des voies pertinentes pour la neurodégénérescence, ainsi qu’avec des phénotypes de résistance multidrogue. En conséquence, Abca2 est fréquemment étudié dans des contextes reliant le transport des lipides aux réponses au stress, à la protéostasie et à la vulnérabilité spécifique de certains types cellulaires dans le système nerveux.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO ABCA2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Abca2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Abca2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Abca2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine ABCA2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Abca2 pour l'étude de la signalisation de ABCA2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Abca2 essentiels à la fonction de ABCA2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Abca2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le ABCA2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le ABCA2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Abca2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le ABCA2 plasmide HDR (m) et le ABCA2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Abca2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Abca2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.