20S Proteasome α7 Lentiviral Activation Particles (h): sc-401897-LAC

PSMA7 kodiert die 20S-Proteasom-Untereinheit α7, eine essenzielle strukturelle Komponente des 20S-Core-Partikels, die zur Assemblierung des Proteasoms und zur Bildung des „gated entry“-Kanals beiträgt, der den Zugang von Substraten kontrolliert. Über das Ubiquitin–Proteasom-System unterstützt α7 den ATP-abhängigen Proteinabbau, der die Zellzyklusprogression, die Signaltransduktion, die Antigenprozessierung für die MHC-Klasse-I-Präsentation sowie die Proteostase unter oxidativem oder proteotoxischem Stress reguliert. Störungen der Proteasomzusammensetzung oder -aktivität können den Abbau zentraler regulatorischer Proteine umgestalten und Signalwege wie die NF-κB-Signalgebung, DNA-Schadensantworten und Apoptose beeinflussen. Eine veränderte Proteasom-Homöostase, einschließlich Änderungen der PSMA7-Expression, wurde in mehreren krankheitsrelevanten Kontexten beschrieben, in denen Proteostase und Immunüberwachung dysreguliert sind, was seine Nutzung als mechanistischen Knotenpunkt in Studien zur Proteasom-Biologie stützt.

20S Proteasome α7 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente PSMA7-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

20S Proteasome α7 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der PSMA7-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen 20S Proteasome α7-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen PSMA7-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.