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17β-HSD双切口酶质粒(h) | sc-402072-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
17β-HSD双切口酶质粒(h2) | sc-402072-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 HSD17B1 基因编码 17β-HSD(17β-羟类固醇脱氢酶 1 型),是一种关键的氧化还原酶,能够催化雌酮向效力更强的雌二醇转化,并有助于维持局部类固醇激素稳态。通过调控雌激素/雄激素的平衡,17β-HSD 融入类固醇生成与内分泌信号通路,影响控制细胞增殖、分化与代谢的转录程序。HSD17B1 活性或表达的改变与多种组织中激素依赖性病理生理过程以及雌激素信号失衡有关。因此,HSD17B1 被广泛用于研究类固醇代谢、受体驱动的基因调控以及内分泌相关疾病机制的模型中。
17β-HSD 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HSD17B1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HSD17B1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HSD17B1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HSD17B1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。