Zu den chemischen Aktivatoren von RSPH9 gehört eine Reihe von Verbindungen, die seine Aktivierung über verschiedene zelluläre Signalwege und -mechanismen fördern können. Phosphatidsäure und Diacylglycerin (DAG) sind aus Lipiden gewonnene Moleküle, die die Proteinkinase C (PKC) aktivieren können. Nach der Aktivierung phosphoryliert PKC RSPH9, was zu dessen funktioneller Aktivierung führt. Forskolin, das den intrazellulären cAMP-Spiegel erhöht, und Isoproterenol, ein beta-adrenerger Agonist, führen beide zur Aktivierung der Proteinkinase A (PKA). Die aktivierte PKA kann dann RSPH9 phosphorylieren und dadurch seine Aktivität verstärken. In ähnlicher Weise hemmt Epigallocatechingallat (EGCG) Phosphodiesterasen, was ebenfalls zu einem Anstieg des cAMP-Spiegels und einer anschließenden Aktivierung von PKA führt, was wiederum die Phosphorylierung und Aktivierung von RSPH9 bewirkt.
Ionomycin und A23187 (Calcimycin) wirken als Kalzium-Ionophore und erhöhen den intrazellulären Kalziumspiegel, der Calmodulin-abhängige Proteinkinasen aktivieren kann. Diese Kinasen wiederum sind in der Lage, RSPH9 zu phosphorylieren und zu aktivieren. Natriumfluorid stimuliert verschiedene Phosphatasen und Kinasen, was zu einer Phosphorylierung und Aktivierung von RSPH9 führen kann. Okadainsäure hemmt die Proteinphosphatasen PP1 und PP2A, was zu einer verstärkten Phosphorylierung von Proteinen, einschließlich RSPH9, führt und damit dessen Aktivierung fördert. Anisomycin aktiviert MAP-Kinase-Wege, was zur Aktivierung von RSPH9 durch nachgeschaltete kinase-vermittelte Phosphorylierung führen könnte. Schließlich könnte die Hemmung von GSK-3 durch Lithiumchlorid die Hemmung von RSPH9 verhindern und damit indirekt dessen Aktivierung durch fehlende hemmende Phosphorylierung fördern.
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