Plásmido Doble Nickase (h) ZNF43: sc-416697-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)ZNF43 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa ZNF43 (h) y el plásmido de doble nickasa ZNF43 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ZNF43. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) ZNF43 | sc-416697-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) ZNF43 | sc-416697-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZNF43 codifica una proteína de dedos de zinc que se prevé que funcione en la unión al ADN de manera específica de secuencia y en la regulación de programas de expresión génica que configuran el estado celular y la transcripción específica de linaje. Como presunto factor nuclear, ZNF43 es relevante para vías que gobiernan la organización de la cromatina, la dinámica de represión/activación transcripcional y el mantenimiento de la estabilidad genómica mediante el control coordinado de genes diana aguas abajo. Las redes alteradas de proteínas con dedos de zinc se asocian con frecuencia a una diferenciación desregulada y a la señalización de respuesta al estrés, lo que aporta una base para investigar ZNF43 en modelos de proliferación y transformación celular. La perturbación funcional de ZNF43 respalda estudios mecanísticos de los circuitos transcripcionales y de las relaciones genotipo–fenotipo en células humanas.
ZNF43 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ZNF43 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ZNF43. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ZNF43. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ZNF43 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.