Plasmide Double Nickase (m) ZIP10: sc-432673-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) ZIP10 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide ZIP10 Double Nickase (m) et le plasmide ZIP10 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Slc39a10. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) ZIP10 | sc-432673-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) ZIP10 | sc-432673-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc39a10 code le transporteur murin d’entrée du zinc ZIP10 (famille SLC39), qui régule la disponibilité cytosolique de Zn²⁺ ainsi que les programmes enzymatiques et transcriptionnels en aval dépendants du zinc. En contrôlant l’entrée du zinc au niveau des membranes cellulaires, ZIP10 influence des processus tels que la transduction du signal, les réponses au stress oxydant et la fonction des cellules immunitaires, où le zinc agit comme second messager et cofacteur. Des altérations de l’homéostasie du transport du zinc ont été associées à une inflammation dérégulée et à un stress métabolique, et la gestion du zinc dépendante de ZIP10 est fréquemment étudiée dans le contexte de la biologie hématopoïétique et épithéliale. Ainsi, Slc39a10 est pertinent pour des investigations mécanistiques des voies régulées par le zinc, notamment la signalisation des cytokines, le contrôle rédox et les programmes de différenciation cellulaire.
ZIP10 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Slc39a10 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Slc39a10. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Slc39a10. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Slc39a10.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.