Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ZC3H7A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-412020
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- ZC3H7A CRISPR/Cas9 ノックアウト（KO）プラスミド（h）は、GeCKO v2ライブラリ由来の配列を用いて最大のノックアウト効率を実現するよう設計された、Cas9ヌクレアーゼおよび標的特異的な20塩基対のガイドRNA（gRNA）をそれぞれコードするプラスミドのプールです
- gRNA配列は、Cas9を誘導してZC3H7Aゲノム座において部位特異的な二本鎖切断（DSBs）を引き起こし、非相同末端結合（NHEJ）を介して遺伝子ノックアウトをもたらします
- ピューロマイシン耐性遺伝子とRFP遺伝子はLoxP部位で挟まれているため、安定したノックアウト細胞株を樹立した後、Creリコンビナーゼ（Creベクター：sc-418923）を用いて選択マーカーを除去することができる。
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: ZC3H7A 抗体 (B-3): sc-398981
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
ZC3H7A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h) | sc-412020 | 20 µg | $397.00 |
概要
ZC3H7A（zinc finger CCCH-type containing 7A）は、CCCH型ジンクフィンガーモチーフを特徴とするRNA結合タンパク質をコードし、転写後の遺伝子発現制御に関与します。ZC3H7Aはリボヌクレオタンパク質複合体との相互作用を介して、mRNAの安定性や翻訳を協調的に制御すると考えられており、細胞ストレス応答や増殖の際に適切な遺伝子発現プログラムを維持することを支持します。さらにZC3H7Aはウイルス—宿主相互作用ネットワークとの関連も示されており、RNA代謝の調節が自然免疫シグナル伝達や病原体の複製に影響し得ます。RNAプロセシングの破綻やストレス適応的な翻訳制御は、がんや炎症性疾患に共通して見られる特徴であるため、ZC3H7AはRNA中心の制御経路の作用機序研究における有用なノードとなります。
ZC3H7A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるZC3H7A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、ZC3H7A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。
このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、ZC3H7Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZC3H7Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。
このCRISPRノックアウトシステムにより、ZC3H7Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、ZC3H7A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。
主な特徴
- ZC3H7Aの機能に不可欠なZC3H7Aエクソンを標的とするsgRNA
導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
ノックアウト効率を向上させるための、ZC3H7Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
トランスフェクションによる導入に対応
設計バリエーション
CRISPRs +/- HDR
- ZC3H7A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZC3H7A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、ZC3H7A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
ZC3H7A HDRプラスミド（h）および ZC3H7A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはZC3H7Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のZC3H7A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。